规格介绍
一、兔多克隆抗体制备服务
1、服务要求：目前我们暂不提供抗原制备服务，客户需自己提供抗原。我们对抗原的要求如下：1）3-5mg蛋白，纯度在85%以上；2）样品溶解于pH偏中性的缓冲液，最好为PBS。如含有尿素，去污剂或有机试剂等请事先告之；3）浓度不低于0.2mg/ml。
2、制备方法：我们用两只健康新西兰大白兔进行抗体制备实验，免疫4次，保证效价在1:32000以上（P/N≥2.1）。实验周期为90天。具体实验过程请参见下表：
| 时间（天） | 实验内容 | 具体说明 |
| 0-7 |
1）抗原检测 2）阴性血清采集 |
1）SDS-PAGE检测抗原纯度；2）抗原浓度检测；3）制备1.5ml免疫前血清 |
| 8 | 第1次免疫 | 抗原与弗氏完全佐剂乳化，多点注射 |
| 29 | 第2次免疫 | 抗原与弗氏不完全佐剂乳化，多点注射 |
| 36 | 取血样1 | 耳缘静脉取血2ml，制备1ml血清 |
| 50 | 第3次免疫 | 抗原与弗氏不完全佐剂乳化，多点注射 |
| 57 | 取血样2 | 耳动脉或心脏采血10ml，制备5ml血清 |
| 71 | 第4次免疫 | 抗原与弗氏不完全佐剂乳化，多点注射 |
| 81 | 颈动脉放血 | 每只兔子可得到60ml左右的血清。 |
| 82-88 | 血清效价检测 | 用间接ELISA测定2-4免血清效价 |
| 89 | 快递交货 | 1）100ml血清；2）效价检测报告 |
3、交货内容
1）1ml免疫前血清；2）100ml-150ml免疫血清，效价大于1:32000；3）效价检测报告：2-4免血清的间接ELISA结果。
备注：我们提供抗体纯化服务，但需要客户额外支付费用。
二、单克隆抗体
1、服务要求：目前我们暂不提供抗原制备服务，客户需自己提供抗原。我们对抗原的要求如下：1）1-3mg纯化蛋白，纯度在85%以上；2）样品溶解于pH偏中性冲液，最好为PBS。如含有尿素，去污剂或有机试剂等请事先告之；3）浓度不低于0.2mg/ml。
2、制备方法：我们免疫4只Balb/c小鼠，通过细胞融合与筛选制备单克隆抗体。实验周期为150天。具体实验过程请参见下表：
| 时间（天） | 实验内容 | 具体说明 |
| 0-7 | 1）抗原检测 | 1）SDS-PAGE检测抗原纯度；2）抗原浓度检测； |
| 8 | 第1次免疫 | 抗原与弗氏完全佐剂乳化，多点注射 |
| 29 | 第2次免疫 | 抗原与弗氏不完全佐剂乳化，多点注射 |
| 50 | 第3次免疫 | 抗原与弗氏不完全佐剂乳化，多点注射 |
| 57 | 取血样 | 眼眶取血100-200ul，用于免疫效果检测 |
| 71 | 加强免疫 | 抗原不加佐剂，剂量加倍，腹腔注射 |
| 74 | 细胞融合 | 用PEG1450将脾细胞与SP2/0细胞融合 |
| 84 | 检测与克隆1 | 细胞培养 |
| 94 | 检测与克隆2 | 细胞培养 |
| 104 | 检测与克隆3 | 克隆一般进行3次，直到阳性率达到100%为止 |
| 105-114 | 检测与扩大培养 | 用于注射小鼠制备腹水与细胞株的冻存 |
| 115-120 | 注射腹水 | 等待腹水长出 |
| 121-140 | 采集腹水 | 完成腹水采集 |
| 141-147 | 腹水纯化与检测 | 采用辛酸-硫酸铵法纯化腹水 |
| 148-150 | 交货 | 1）实验记录；2）两株单克隆的杂交瘤细胞；3）两株单抗的纯化腹水各5ml。 |
1）实验记录；
2）两株单克隆的杂交瘤细胞；
3）两株单抗对应的纯化腹水各5ml。
